We use cookies to understand how you use our site and to improve your experience. This includes personalizing content and advertising. To learn more, click here. By continuing to use our site, you accept our use of cookies. Cookie Policy.

Features Partner Sites Information LinkXpress
Sign In
Advertise with Us
Technopath Clinical Diagnostics

Download Mobile App




Анализы высвобождения цитокинов могут использоваться для обнаружения лейшманиоза у реципиентов трансплантатов

By LabMedica International staff writers
Posted on 18 Jan 2016
Print article
Цветной снимок, полученный с помощью сканирующего электронного микроскопа, на котором видно, как лейкоцит-макрофаг поглощает промастиготу лейшмании (фото любезно предоставлено Юргеном Бергером (Juergen Berger)).
Цветной снимок, полученный с помощью сканирующего электронного микроскопа, на котором видно, как лейкоцит-макрофаг поглощает промастиготу лейшмании (фото любезно предоставлено Юргеном Бергером (Juergen Berger)).
Мазок-отпечаток пациента, зараженного Leishmania infantum, демонстрирующий многочисленные тельца представителей простейших, фагоцитируемые макрофагами (фото любезно предоставлено доктором Ютака Тсуцуми (Yutaka Tsutsumi)).
Мазок-отпечаток пациента, зараженного Leishmania infantum, демонстрирующий многочисленные тельца представителей простейших, фагоцитируемые макрофагами (фото любезно предоставлено доктором Ютака Тсуцуми (Yutaka Tsutsumi)).
Анализы высвобождения цитокинов использовались, чтобы определить распространение инфекции, вызванной Leishmania infantum, среди реципиентов трансплантатов паренхиматозных органов, живущих в регионах, где микроорганизм является эндемическим вследствие вспышки заболевания.

Испания имеет один из самых больших в мире фондов доноров органов и является мировым лидером с точки зрения числа пересадок, которые выполняются в стране, но наблюдающаяся в данный момент вспышка лейшманиоза в Фуэнлабраде, в юго-западной области провинции Мадрид, включала 600 клинических случаев с конца 2009 года, уровень распространения составлял 0.2%.

Ученые из Института здоровья имени Карла III (Мадрид, Испания) включили в исследование 63 реципиента трансплантатов паренхиматозных органов (почек, печени и сердца), проживавших в городе Фуэнлабраде, возраст которых составлял 18 лет или старше, которым были проведены операции по трансплантации между 2005 годом и 2013 годом. Пятьдесят семь участников клинического исследования прежде не сталкивались со случаями заражения висцеральным лейшманиозом или сходной симптоматикой и шесть были вылечены от висцерального лейшманиоза.

Экстракт антигена Leishmania infantum был подготовлен из промастиготной формы стационарной фазы культур паразитических организмов. Мононуклеарные клетки периферической крови были выделены с помощью разделения на центрифуге по плотности, собранные клетки были выращены в питательной среде RPMI-1640. Пролиферация клеток была изучена путем включения бромдезоксиуридина с использованием комплекта Biotrak для пролиферации клеток методом твердофазного иммуноферментного анализа (подразделение Life Sciences компании GE Healthcare; Литтл Чалфонт, Великобритания). Надосадочные жидкости культуры клеток in vitro были собраны и хранились при -20 °C для количественного определения цитокинов. Цитометрический количественный анализ был выполнен с помощью BD Cytometric Bead Array Human Flex Set, данные были получены с использованием проточного цитометра FACSCalibur (компания Becton Dickinson Biosciences, Франклин Лейкс, штат Нью-Джерси, США).

Семнадцать участников исследования (12 не зараженных висцеральным лейшманиозом и 5 вылеченных от висцерального лейшманиоза) продемонстрировали очевидную лимфопролиферативную реакцию на растворимый антиген лейшмании. Стимуляция культур мононуклеарных клеток периферической крови или цельной крови с помощью растворимого антигена лейшмании привела к выработке различных комбинаций цитокинов, что, вероятно, поможет подтверждать заражение лейшманиозом или выздоровление от висцерального лейшманиоза и поможет препятствовать тому, чтобы вылеченные пациенты снова заболели этим серьезным недугом. Результаты показали, что исследования на клеточно-опосредованный иммунитет крайне важны для обнаружения воздействия L. infantum, поскольку одних только серологических исследований недостаточно. Это особенно актуально, когда пытаются обнаружить наличие признаков воздействия у людей с ослабленным иммунитетом, которые наиболее подвержены риску заболеть лейшманиозом после заражения или наступления рецидива заболевания после лечения висцерального лейшманиоза.

Авторы пришли к заключению, что их результаты подчеркнули необходимость использования тестов, которые обнаруживают клеточно-опосредованный иммунитет при проведении обследования людей, не проявляющих симптомы заболевания, в областях, где широко распространен лейшманиоз. Они также показывают, что анализы культур мононуклеарных клеток периферической крови и/или цельной крови могут использоваться, чтобы обнаруживать выработку цитокинов в качестве маркера инфекционного заболевания. Продуцирование интерферона гамма (IFN-γ), фактора некроза опухолей альфа (TNF-α), гранзима В, интерлейкина 5 (IL-5) и интерлейкина 10 (IL-10) мононуклеарными клетками периферической крови, стимулированными растворимым антигеном лейшмании, и IFN-γ, TNF-α и интерлейкина 2 (IL-2) периферической кровью, стимулированной растворимым антигеном лейшмании, могло бы использоваться для проверки воздействия лейшмании, особенно для пациентов, подверженных индуцированной иммунодепрессии. Исследование было опубликовано 23 октября 2015 года в журнале Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.

Ссылки по теме:
Instituto de Salud Carlos III
General Electric Healthcare Life Sciences
Becton Dickinson Biosciences


Print article

Channels

Pathology

view channel
Image: The Idylla system is a fully-automated, real-time polymerase chain reaction (PCR) based molecular testing system designed to offer results in a minimal amount of time (Photo courtesy of Biocartis).

Rapid Genomic Profiling of Colon Cancers Improves Therapy Selection

Colorectal cancer is a malignant tumor arising from the inner wall of the large intestine (colon) or rectum. Colorectal cancer is the third leading cause of cancer in both men and women in the USA.... Read more
Copyright © 2000-2020 Globetech Media. All rights reserved.