Генетические методы позволяют быстро диагностировать болезнь Хантингтона

Состояние обычно приводит к смерти через 15-20 лет после постановки диагноза. Причиной заболевания является область в гене HTT (Huntingtin gene), которая отсутствует у здоровых людей.

Разработана новая система "лаборатории на чипе", получившая название µLAS (µLAboratory for DNA Separation), которая состоит из двух идентичных параллельных каналов, работающих с одинаковыми параметрами срабатывания, чтобы характеризовать образец по отношению к эталонному маркеру длины ДНК в реальном времени.

Ученые из Университета Лозанны (University of Lausanne; Лозанна, Швейцария) извлекли ДНК из клеток крови, амплифицировали соответствующий участок и определили его размер с помощью недавно разработанного чипа. Чип содержит две маленькие воронкообразные камеры шириной в один миллиметр. К этим камерам прикладывается напряжение и давление, чтобы отделить электрически заряженные фрагменты ДНК в соответствии с их размером. Меньшие фрагменты выталкиваются в воронку намного сильнее, чем крупные. Добавив флуоресцентный краситель, команда легко обнаружила точное положение фрагментов под микроскопом и установила их длину.

Переменная длина фрагментов ДНК обусловлена повторением трех нуклеотидов генетического кода (CAG), типичных для тринуклеотидных заболеваний, таких как болезнь Хантингтона. Мутация приводит к разрушительным изменениям в кодируемом белке, которые в настоящее время не до конца понятны, но известно, что белок, продуцируемый мутантным геном, токсичен для клеток мозга. Здоровые люди имеют 35 или менее таких повторов, в то время как большинство пациентов имеют 40 или более. Знание точного размера важно для прогнозирования и ведения этой неизлечимой болезни. Ученые обнаружили длины инородных аллелей в восьми образцах у пациентов с миотонической дистрофией 1-го типа и у пациентов с болезнью Хантингтона, у которых отмечалось до 750 повторов CAG/CTG в течение пяти минут или менее.

Высокая чувствительность метода позволила минимизировать количество циклов амплификации и, таким образом, уменьшить артефакты амплификации, не ставя под угрозу обнаружение расширенного аллеля. Эти результаты предполагают, что µLAS может ускорить рутинное применение повторяющихся последовательностей в молекулярной биологии и улучшить молекулярную диагностику нарушений расширенного повтора. Болезнь Хантингтона является лишь одним из двадцати известных тринуклеотидных заболеваний. Другими являются спиноцеребеллярная атаксия, синдром ломкой X-хромосомы, миотоническая дистрофия и атаксия Фридрейха. В настоящее время методов лечения этих наследственных заболеваний не существует. Исследование было опубликовано 10 января 2019 года в журнале Scientific Reports.

Ссылки по теме:
Университет Лозанны