We use cookies to understand how you use our site and to improve your experience. This includes personalizing content and advertising. To learn more, click here. By continuing to use our site, you accept our use of cookies. Cookie Policy.

Features Partner Sites Information LinkXpress
Sign In
Advertise with Us
Eurofins Technologies

Download Mobile App




Комбинированные ДНК-технологии проанализированы на диагностику малярии

By LabMedica International staff writers
Posted on 29 Nov 2018
Print article
Набор Loopamp Malaria Pan Detection Kit - это качественный тест на обнаружение возбудителей малярии (Plasmodium ovale, P. vivax, P. malariae и P. falciparum) в образцах крови человека (фото любезно предоставлено Human Diagnostics Worldwide).
Набор Loopamp Malaria Pan Detection Kit - это качественный тест на обнаружение возбудителей малярии (Plasmodium ovale, P. vivax, P. malariae и P. falciparum) в образцах крови человека (фото любезно предоставлено Human Diagnostics Worldwide).
Малярия является одним из наиболее важных паразитарных инфекционных заболеваний, риску заражения которыми подвержена почти половина населения мира. В настоящее время доступно несколько диагностических методов для обнаружения инфекции, однако по-прежнему требуются более чувствительные тесты для применения во внелабораторных условиях.

Метод изотермической амплификации с формированием петель (loop-mediated isothermal amplification - LAMP) представляет собой инструмент для амплификации ДНК, в котором она может быть достигнута путем инкубации при стабильной температуре. Параллельно становится доступным простой метод выделения ДНК, способ сверхбыстрого выделения (procedure for ultra-rapid extraction - PURE), который может продуцировать ДНК-раствор, подходящий для реакции LAMP без использования центрифуги.

Ученые из Университета Цукубы (University of Tsukuba; Ибараки, Япония) и их коллеги использовали в качестве эталона вложенную полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и протестировали 117 образцов, включая 46 образцов Plasmodium falciparum, 7 P. vivax, 9 P. ovale, 4 P. malariae, и 51 отрицательный случай. Микроскопический диагноз проводился микроскопистами-экспертами на оптических микроскопах с окрашенными по Гимзе тонкими мазками крови. Быстрые диагностические тесты (Rapid diagnostic tests - RDT) проводились с использованием BinaxNow Malaria. ДНК была выделена с использованием набора для выделения ДНК Loopamp PURE DNA Extraction Kit, реакции LAMP проводились с помощью набора Loopamp MALARIA Pan/Pf Detection Kit.

Команда сообщила, что PURE-LAMP Pan правильно идентифицировала 64 из 66 положительных и 51 отрицательных образцов. Среди Pan-положительных образцов 45 образцов P. falciparum также были обнаружены с помощью PURE-LAMP Pf. Наборы PURE-LAMP Pan и PURE-LAMP Pf имели соответствующую чувствительность 96,96% и 97,82% и общую специфичность, равную 1. Все отрицательные по PURE-LAMP также были признаны отрицательными с помощью микроскопии. Только два образца, положительных по PURE-LAMP [Pan(+)Pf(+)], которые соответствовали диагнозу P. falciparum с помощью вложенной ПЦР, были ошибочно диагностированы с помощью микроскопии как отрицательные.

Авторы пришли к выводу, что фильтровальная бумага может использоваться в качестве вспомогательного средства в полевых условиях, так как позволяет собирать, переносить и хранить образцы без холодильной камеры. Учитывая разработанный для полевых условий комбинированный метод PURE-LAMP, подобная система с высушенными образцами крови позволит максимально эффективно использовать свойство фильтровальной бумаги при правильной эксплуатации. Система PURE-LAMP является надежной при использовании с сухими каплями крови и может применяться во внелабораторных условиях. Исследование было опубликовано 22 октября 2018 года в журнале Malaria Journal.

Ссылки по теме:
Университет Цукубы


Print article

Channels

Microbiology

view channel
Image: Stenotrophomonas maltophilia colonies on sheep blood agar. Cultivation 48 hours in an aerobic atmosphere, 37 °C (Photo courtesy of microbiologyinpictures).

Global Spread of the Multi-Resistant Pathogen Stenotrophomonas Maltophilia Revealed

Stenotrophomonas maltophilia strains occur in several natural and human associated ecosystems. The bacterium was long regarded as relatively unproblematic, but is now considered to be one of the most feared... Read more
Copyright © 2000-2020 Globetech Media. All rights reserved.