We use cookies to understand how you use our site and to improve your experience. This includes personalizing content and advertising. To learn more, click here. By continuing to use our site, you accept our use of cookies. Cookie Policy.

Features Partner Sites Information LinkXpress
Sign In
Advertise with Us
GLOBETECH PUBLISHING LLC

Download Mobile App




Новая технология 3D-печати снижает стоимость иммуноферментного анализа

By Labmedica International staff writers
Posted on 10 Jul 2019
Print article
Уникальный наконечник для пипетки, созданный на 3D-принтере, для проведения иммуноферментных анализов (фото любезно предоставлено Университетом Коннектикута).
Уникальный наконечник для пипетки, созданный на 3D-принтере, для проведения иммуноферментных анализов (фото любезно предоставлено Университетом Коннектикута).
Традиционный иммуноферментный анализ (ИФА) проводят на планшетах с 96 микролунками; каждая лунка работает как отдельная испытательная камера, где они могут быть объединены с различными агентами, которые затем будут реагировать с образцом, как правило, путем изменения цвета.

Несмотря на эффективность и точность, оборудование, используемое для запуска ИФА, является дорогостоящим, часто обходится в тысячи долларов для установки в лаборатории и требует специального обучения специалистов для проведения анализов, поскольку неправильные методы могут привести к неверным результатам. Агенты, используемые в фактических тестах, обычно различные формы антител, также могут быть дорогими.

Ученые из Университета Коннектикута (University of Connecticut; Сторрс, штат Коннектикут, США) создали "ИФА в наконечнике" (ELISA in a tip) на основе пипеток в качестве нового универсального диагностического инструмента, отличающегося лучшей чувствительностью, более коротким временем инкубации, доступностью и малым объемом образцов и реагентов по сравнению с традиционными ИФА. Сбор и анализ данных с помощью мобильного телефона облегчает электронную доставку результатов поставщикам медицинских услуг.

Наконечники для пипеток были разработаны и напечатаны на 3D-принтере в качестве адаптеров для большинства коммерческих пипеток объемом 50–200 мкл. Захватываемые антитела (Ab1) иммобилизируются на внутренних стенках наконечника пипетки, который служит в качестве аналитического отсека, куда и откуда при помощи пипетки перемещаются образцы и реагенты. Сигналы генерируются с использованием колориметрических или хемилюминесцентных (ХЛ) реагентов и могут быть количественно определены с помощью мобильного телефона, ПЗС-камеры или планшет-ридера.

Стандартные микролунки для планшетов ИФА вмещают 400 мкл жидкости в каждой, но реакции, необходимые для измерения результатов тестов, происходят только на пластиковых стенках лунки. В то время как 3D-напечатанные наконечники ИФA вмещают всего 50 мкл, конструкция резервуара внутри наконечника значительно увеличивает площадь поверхности, на которой происходят реакции, что позволяет ученым использовать гораздо меньше дорогостоящих антител для проведения теста и значительно сокращает время, необходимое для обработки теста и считывания результатов.

Команда использовала ИФA с пипетным наконечником для обнаружения четырех белков биомаркеров рака с пределами обнаружения, подобными или меньшими, чем ИФA для микропланшетов, при 25% стоимости и времени анализа. Извлечение этих белков из сыворотки крови с добавками составляло от 85% до 115% или лучше, в зависимости от режима обнаружения. При использовании ПЗС-камеры количественное определение ХЛ с помощью фемто-люминольного реагента дало пределы обнаружения (ПО) всего 0,5 пг/мл. Тринадцать образцов пациентов были проанализированы на три белка биомаркеров с результатами, хорошо коррелирующими с традиционным ИФА и установленным микрофлюидным электрохимическим иммуноанализом.

Магистр наук, научный сотрудник и первый автор исследования Мохамед Шарафельдин (Mohamed Sharafeldin) сказал: "Мы не хотели сильно изменять традиционный ИФА, а только внесли инженерные, контролируемые изменения. Итак, основы одинаковы. Мы используем те же антитела в тех же концентрациях, что и с обычным или традиционным ИФА, поэтому протоколы остаются прежними. Все, что может быть выполнено с помощью обычного ИФА, может быть использовано с таким преимуществом, как более дешевое, намного более быстрое и доступное". Исследование было опубликовано 3 мая 2019 года в журнале Analytical Chemistry.

Ссылки по теме:
Университет Коннектикута


Print article

Channels

Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.